广西净化车间实验动物房工程

中净环球净化可提供动物房，动物实验室，动物洁净室，动物无菌室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。
SPF级动物实验室是生命与科学研究中公认的标准实验动物，生物等领域的发展和进步依赖于高质量的实验动物，而科学的管理和运行SPF级动物实验室则是提供该级别实验动物的前提条件。按照《*共和国实验动物管理条例》的要求，管理和运行SPF级动物实验室，必须采取一系列的管理措施。
1.实行严格有效的科学管理
SPF级动物实验室从规划设计、建筑构造、装备设施、投入使用到监测管理，均是在组的下完成。坚持每年在《实验动物使用许可证》到期时，主动向上级申请进行年度检测和，以查明存在的问题和隐患，及时整改；每3个月对实验室的设备和内外环境进行检测。在强化硬件建设和管理的同时，还制定了一系列的规章制度，保证SPF级动物实验室的有效运行。
2.制定SPF级动物实验室的规章制度和管理措施
为保证SPF级动物实验室在符合要求的状况下正常运作，参照有关国家标准，从实际情况出发，制定了一系列科学有效的规章制度和管理措施，以规范日常的每一项工作。制定的规章制度和管理措施有：“出入SPF级动物实验室须知和管理规程”、“SPF级动物实验室的内外环境灭菌消毒与卫生清洁管理规范”、“SPF级动物实验室动物的饲养管理规范”、“SPF级动物实验室的记录管理规范”、“SPF级动物实验室动物尸体及其他实验废弃物处理规范”等。
3.严格规定实验室人员、动物、物品的移动路向
进出SPF级动物实验室的人员、动物、物品严格遵循单向顺时针移动的原则。
（1）人员移动路向。外环境→一较→淋浴→二较→气闸→清洁走道→实验室→污物走道→缓冲间→清洗消毒间→外环境。
（2）动物移动路向。SPF级实验动物→隔离观察室→清洁走道→实验室→污物走道→缓冲间→清洗消毒间→外环境。
（3）物品移动路向。外环境→清洗消毒间→高压灭菌器/渡槽/传递窗→洁物存放室→实验室→污物走道→缓冲间→清洗消毒间→外环境。
4.选择合理的消毒灭菌方法
进入SPF级动物实验室的各种物品的特性不同，因此消毒灭菌的方法也有差异。垫料、饲养笼具、工作服和实验器械等采用高压蒸汽灭菌；动物饲料采用紫外灯照射30～60min灭菌消毒；使用的帽子、口罩、手套和鞋套等均采用一次性产品，使用前统一采用紫外线30min照射灭菌消毒；拖鞋等采用渡槽浸泡的方法（0.3%84消毒液，浸泡时间为30min）消毒；不耐高温和强酸碱等的物品采用紫外线照射灭菌。
5.认真开展各项指标的检测工作
定期对ZY空调通风和换气系统进行维护保养；每周清洗排风口过滤网膜，每3个月全部更换；初效、中效和GX过滤器每3个月更换一次；每日监测和记录空调机箱运行状态、压力差值和温度、湿度等信息；每3个月检测一次动物用水的生态指标。
6.严格做好室内外环境和设施的清洁消毒
高洁净度是SPF级动物实验室正常运行的关键。每日工作结束后，需用0．3%84消毒稀释液对整个实验室的内环境、手术器械和饲养笼具等进行消毒，同时保证室外环境的洁净度。
7.做好日常登记工作
制定有“SPF级动物实验室动物使用及出入记录本”、“SPF级动物实验室人员出入记录本”、“SPF级动物实验室物品出入记录本”、“SPF级动物实验室温湿度记录本”、“SPF级动物实验室压差记录本”、“SPF级动物实验室空调机箱运行记录本”“SPF级动物实验室清洁区消毒记录本”、“SPF级动物实验室设备使用记录本”，记好工作日志。建立实验动物电子档案，详细记录外购动物的检况、合格证编号、品种、体重、数量、来源和用途等信息。
8.妥善处理动物尸体
动物实验结束后，根据不同的实验内容，将动物尸体分类，统一放置在－20℃的冰柜内，有要求的可放置在防腐溶液内，由具备相关资质的企业处理。
9.废弃化学物品和废水的处理
所有实验后的化学物品，包括过期物品，按照要求分类放在特定的回收装置内，由实验设施管理部门统一处理。废水必须二氧化氯发生器处理后，才可流入到外环境。

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动物房实验室设置不同的功能区介绍
动物实验室设备功能区的建设需要根据实际要求和相关条件规定进行设计装修，今天中净环球净化主要了解一下动物实验室的、缓冲间及洗消间各司其职，都需要满足什么样的功能。
（一）
在设计动物和出口时，需要考虑到装卸区。如果需要饲养大型动物，装卸区是一个非常重要的地方，同时也是一个动物实验室是否设施设计的重要标志之一。设计人员需充分了解该动物实验室研究对象的特征，通过对空间、围栏、门、地面、过道、机关等进行合适的设计，使动物可以顺利地进入设施，并减少动物的反抗行为、焦虑情绪和身体伤害，同时也要有利于污染控制，设计师需要考虑的因素包括:
1．人员通常会考虑和淋浴、 较衣间等结合设置。如果设施较大，男女人员的分别设置，可以减少等待时间。
2．动物出一般考虑设计为双门、缓冲间或气锁。对于生物安全级、和的动物设施，在动物饲养间的出设置缓冲间是强制性要求。双门、缓冲间或气锁对于减少气流交换、降低嗓音、防止动物逃脱和野外动物进入等均可起到关键作用，将设施的出设计为正压有助于防止环境有害因素进入设施。
3．通道指传递窗 、渡槽和传输管道等，双扉高压锅也可以发挥通道的功能。这些通道具有“捷径”和避免开关门的作用，需根据工作要求和污染控制要求选择功能和大小合适的传递窗、渡槽、传输管道和双扉高压锅等
4．走廊的宽度需达到1.83-2.44米，便于可以让各种设备通过。在一些区域还需加装保护栏杆，防止被撞击。走廊不能作为储存物品之用。墙上的按钮、开关、管线、电话、灭火报警、配电盒和水龙头等设置在合理位置，并加装保护设备。三仁温馨提示：大型动物/尸体的转运可能需要吊装、传带、轨道车等装置的帮助，需要预先设计。
5．需考虑防止昆虫等野外动物进入和实验动物外逃的设计，并保证有效。由于动物设施的气味和环境，很容易吸引苍蝇、蟑螂、蚂蚁、野鼠，如果围护结构不严密则防不胜防。认为正压设施有气体屏障而对围护结构的要求不需很高的观念是片面的认识。
（二）缓冲间
根据GB19489《实验室生物安全通用要求》，缓中间可定义为“设置在被污染概率不同的实验室区域间的密闭室，需要时设置机械通风系统，其门具有互锁功能，不能同时处于开启状态”，即机械通风可以视情况设置。双门互锁的房间是一个基本的缓冲间，缓冲间的面积不宜过大，可结合较衣、淋浴、消毒等功能。缓冲间的机械通风方式可以包括以下几种方式:
①　机械排风和机械送风;
②　机械排风，自然送风(漏风)
③　机械送风，自然排风漏风)
在上述种情况，如果围护结构和门达到气密性要求，即是所谓的气锁。实践，缓冲间是隔离或降低两个不同空间之空气相互交叉的有效方式，也有隔高噪声、冷热、防止蚊虫进入和动物逃逸、节能等作用。缓冲间可以连接两个区域或多个区域，何时需要设置缓冲间取决于其相邻区域是否有不相容的因子需要相互隔高。为降低意外事故带来的风险，GB1489要求，饲养携带病原微生物动物的饲养间(ABSL- 2至ABSL-4防护水平)的出需设置缓冲间。隔高检疫室需设置缓冲间。密封性良好的门并不能代替缓冲间的作用，几十帕斯卡或上百帕斯卡的压力实际很小，如果没有缓冲间，在开门的时候会出现明显的双边气体交换和压力变化。传递窗、渡槽等作用类似于缓冲间。如果进入到缓中间的空气中含有不可接受的危险因子，缓冲间需要具备自净化或消毒条件。物品出处设置缓冲间/气锁，可以对一些大型设备/物总进行消者，以符合出入要求。
在处可以设置风淋室并兼缓冲间，如果有条件，宜采用地面回风系统，或采取其它的措施如粘性“地面等，以捕获被吹落的各种微小物除。
（三）洗消间
洗消间在动物设施中占据重要地位。污染物可分为普通污染物和危险污染物，普通的污染物可以清洁后或进一步消毒后再次使用，危险污染物需去除危险因子使之成为普通污染物后在进行清洁和消毒。
GB19489《实验室生物安全通用要求》规定，涉及高致病原微生物的污物或其包装的表面须可靠消毒灭菌后运出饲养间。意味着一种布局方案是对污物进行包装，并对包装的表面进行可案的消毒灭菌，然后运出饲养间，但是，还须在防护区域内进行消毒灭菌处理，之后按普通的污物理处，另一种方案是饲养间或风险水平相同的通道等功能区与双扉高压锅直接相连。当动物笼具较多或较大的情况下，采取*二种方案较切合实际需求。
近年来，洗消设备发展的趋势是自动化和多功能化，如换笼工作站，这些设备的安装和对空间的要求要遵循制造商的建议，需在设施的规划期就要考虑，或预留出发展空间。

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实验室生物安全防护的基本原则：
安全设备和个体防护；实验室设计与建造的要求；
安全操作规程；致病微生物及其在实验室之间的传递；
管理制度；微生物危害评估。
实验室内务管理：
1）有内务管理的政策和程序，包括内务工作所用清洁剂和消毒灭菌剂的选择、配制、效期、使用方法、有效成分检测及消毒灭菌效果监测等政策和程序，应评估和避免消毒灭菌剂本身的风险。
2）不应在工作面放置过多的实验室耗材。
3）应时刻保持工作区整洁有序。
4）应专人使用经核准的方法和个体防护装备进行内务工作。
5）不应混用不同风险区的内务程序和装备。
6）应在安全处置后对被污染的区域和可能被污染的区域进行内务工作。
7）应制定日常清洁计划和清场消毒灭菌计划，实验室设备，工作表面。
8）专人监督内务工作，定期评价。
9）实验室的内务规程和所用材料发生改变时通知实验室负责人。
10）实验室规程、工作习惯或材料的改变可能对内务人员有潜在危险时，通知实验室负责人并书面告知内务管理负责人。
11）发生危险材料溢洒时，启用应急处理程序。
12) 相关记录安全保存。
实验室操作与技术：
工作时进出受约束或受限制；禁止吃、喝、吸烟；禁止用口移液；将溅洒和气溶胶减到少；每天对工作面消毒；将废物消毒；保持对昆虫和啮齿类动物的控制。
入实验室：门禁，较衣，填写准出入实验室表。
查看实验室：仪器，试剂，标本，填写使用记录。
操作：防漏，防气溶胶，自身保护，遵守SOP。
废弃物处理：废物桶，废物袋，高压（指示物），登记。
出实验室：较衣，清洁，消毒，填写出入实验室表。
标识系统：
设置原则：安全、明确、醒目、便利、通用。
标识系统分类：警告标识、禁止标识、指令标识、提示标识。

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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室（二）
实验室内，还会有以下常用的基本设备。
I.仪器：
1）显微镜:倒置显微镜是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一，便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
2）培养箱：体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，大多数情况下，适温度是 37'℃,温差变化一般不应**过±0.5'℃,细胞在温度升高 2^C时，持续数小时即不能耐受，40°℃ 以上捋很快。因此需要有能控制温度的培养箱，如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO₂培养箱。
3）干燥箱:川于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，电热干燥箱升温较高，一般需达到 160°c 以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至 10（TC时，停止鼓风，应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏，应等候温度自然下降至 100°c以下方可开门。
4）水纯化装置:细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装贾或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除**物，因此用水时尚需冉次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水：即使是用于玻璃器皿的冲洗，也应使用二次以上蒸馏水。
5）冰箱：细胞培养室必须配备。
普通冰箱或冷藏杞
储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本
低温冰箱(-20 °c)、温冰箱
用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂，如酶、血清等。
细胞培养室的冰箱应属，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。
6）细胞冷冻储存器：储存器常用的是液氮界器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小，取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。液氮界器的大小可自25L～500L,可以储存1m1的安甑250～15000个左右液氮温度可低达-196℃,使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发，应注意观察存留液氮情况，及时定期补充液氮，避免挥发过多而致细胞受损。
7）离心机：进行细胞培养时，常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作，通常需要使用离心机。
一般可常规配置 4000rpni 的国产台式离心机，例如细胞沉降，使用 80～100g的离心机即可，离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
另外，可根据需要添置其他类型如大容显或可调节温度的离心机等。
若需用途，例如某些细胞的分离制备需梯度离心，则需另行配置实验所需的具备其他功能的离心机。
8）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
分析大下的感;W:为 0.1mg、0.01mg和10.001mg。根据称取物质的;W:和称精度的要求，选择适宜级别的天平。要求精密称定时，当取样量大于 100mg 选用感量为 0. 1mg 天平，在 100— 10mg选用感量为 0.01mg 天平，小于10mg选用感量为 0.001mg 天平。
9)消毒器：直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
10）滤器：目前细胞培养工作中采用的培养用液，包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质，这些物质在商温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多朵用滤过沙毒以除去细胞。

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