ubi20z2切片厚度50~100nm为宜:太薄反差低;太厚反差好,但结构重叠,电子束不能穿透;,3切片应耐电子束的强烈照射,不变形不升华;,4切片能够适当被染色,保证一定的反差;,5切片均匀,无影响拍照的皱褶、刀痕或染色污染,其中,DigitalMicrograph不仅能够自动识别Gatan公司电镜拍摄的dm3、dm4、Tif文件中的标尺、放大倍数、仪器型号等信息,还能够对图片中进行上伪色突出对比度、选区傅里叶变换、划线取向灰度分析等。
沿管壁缓慢加入戊二醛预固定液,不要冲击细胞团,静置30min后可送样,请在4~10℃保存或运输,严禁结冰(太靠近冰箱后壁或冰袋运输都可能使样品结冰,冬季宁可常温送样),细胞高速离心收集方法,本方法过去被大多数单位采用,没有“GT2”时的应急取材也可使用,各仪器公司的拍摄控制软件是比较专业化的处理工具,能够在处理基本粒径分析、晶面间距等测量外,还能够进行傅里叶变换、降噪处理等,得到更加深入的数据结果。
锇酸是强氧化剂,固定脂类、膜结构,有电子染色作用,3脱水,用适当的有机溶剂取代组织和细胞中的游离态水分,使之能与包埋剂混合,脱水要彻底,更换液体动作要迅速,脱水时间不宜过长,且固定后的样品要充分漂洗,4渗透、包埋与聚合,4,1渗透,2包埋与聚合,加温在60℃聚合形成固体基质,牢固地支撑整个细胞结构或组织,制成适于机械切割的固体树脂包埋块,利于切片,常用玻璃刀、钻石刀进行超薄切片,刀上要装水槽,并注入槽液。
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