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浅析实验动物房的工程设计(-)
一、实验动物房设计概述
法规相关规定
实验动物房应该严格按照国家相关规范来设计。目前实验动物房的建造设计需要遵循的国家规范主要有:GB 14925—2010《实验动物环境及设施》和GB 50447—2008《实验动物设施建筑技术规范》。
这些规范对目前国内生物制药企业使用的实验动 物房的硬件设施,如建筑、空调、水、电等均有详细的要求。
1.2 动物饲养环境设施分类
目前,生物制药企业的动物饲养环境设施可分为三类,主要使用前两类环境设施饲养动物。
2.1 普通环境设施
该环境设施符合动物居住的基本要求,但不能 完全控制因子,适用于饲育教学等用途的普通级实验动物。目前企业通常在普通空调环境下饲养 家兔,饲养的环境要求:温度18~29 ℃,相对湿度 40%~70%,换气次数8次/h,无特定压差。
2.2 屏障环境设施
该环境设施适用于饲育清洁实验动物及无特 定病原体的实验动物,该环境严格控制人员、物品和环境空气的进出。目前企业通常在该环境下饲养 小鼠和,饲养的环境要求:洁净度7级,温度 20~26 ℃,相对湿度40%~70%,换气次数15次/h,压差10 Pa[2] 。
2.3 隔离环境设施
该环境设施采用无菌隔离装置以保存无菌或无外来污染的动物,环境要求较高。
目前生物疫苗生产企业较少采用该环境设施。
二、实验动物房的布局
由于实验动物容易受到环境干扰,且在饲养过 程中会产生异味,影响其他生产或生活用房,因此, 实验动物房总体布局的选址和建造基本要点有:
(1)立建造动物房;
(2)避开车流和密集处,避开厂区震动和 噪声大的区域;
(3)选择在全年主导风向下风处,且对厂区其 他生产或生活设施影响小的区域。
2.2 工艺平面布局
实验动物房的工艺平面布局设计应该在符合 法规要求的前提下,达到布局合理、、经济、安 全等目的。
2.1 工艺设计流向
实验动物房的工艺设计流向包括:实验人员、 饲养人员和检疫人员的进入和退出路线;动物的 进 入和退出路线,解剖和废弃尸体的流向;动物用垫料和饲料的进出流向;笼器具进出流向;样品进出流向等。
各种流向需要合理分流,避免交叉 污染。
2.2 功能间设置
实验动物房从功能间设置上主要包括人员的 较衣间、动物饲养间、实验间、动物检验间、洁净物 品存储间、清洗间、解剖间、饲料和垫料的存储间等,各功能间设置需齐全、合理。
2.3 走廊模式
目前常见的实验动物房走廊模式有:
普通的家兔实验动物房以及小规模的SPF小鼠实验动物 房设置为单走廊模式,而大规模的SPF小鼠和 实验动物房则多采用双走廊或多走廊模式。
2.4 工程成本
实验动物房的建设和运行成本都很高,因此在建造设计之初就必须考虑周全。
(1)从功能面积上考虑,在够用的前提下遵循紧凑、合理的原则。
(2)由于动物房基本采用全新风系统,因此净化空调的房间吊顶高度一般情况下以2.3~2.5 m为 宜,以减少运行成本。
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动物实验室建筑防护区
建筑防护区主要指动物实验室所在的实验室建筑。实验室建筑内有动物设施和其它设施之分,其它设施可以与动物设施有关,也可以无关;动物设施可以就是实验室建筑的主体,也可以是其部分。需要考虑的主要问题是动物设施环境与实验室建筑物内其它区域环境的相互隔离与相互关系,人员、动物、物料和废物的进出路线。使用时,动物设施及其相关的设施宜集中布置,从事感染动物活动的设施需要单布置。实验室建筑除主外,要考虑设置动物、大型设备和废物的出口和。
出于安全考虑,必须评估和明确对门窗的性能要求。在合理控制数量的前提下,对门窗的大小、形状、耐冲击能力、耐火性、保温性、光学特性等均要有要求。可能的风险来自于异常的气候、自然灾害、人为破坏、设备异常等,如,通风系统的异常可造成室内压力急剧变化,造成门窗损坏。
在竖向布局方面,动物实验室宜布置在低层,以方便运输动物和物料。较大型的实验动物设施通常有相对复杂的通风空调系统和污水处理系统,常采用所谓“三明治”结构。这种结构的特点是设备维护方便,如果设计有备份系统,可以实现真正意义上的连续工作,避免影响实验活动。国内一些设施,将管道等放入设备夹层(吊顶),虽可以降低总层高和节省建设费用,但狭小的空间不利于维护设备和进行性能检测,从长期来看,增加的维护费用、改造费用可能会远远大于当
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构建动物细胞培养室和植物细胞培养实验室(二)
实验室内,还会有以下常用的基本设备。
I.仪器:
1)显微镜:倒置显微镜是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
2)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,适温度是 37'℃,温差变化一般不应**过±0.5'℃,细胞在温度升高 2^C时,持续数小时即不能耐受,40°℃ 以上捋很快。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO₂培养箱。
3)干燥箱:川于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,电热干燥箱升温较高,一般需达到 160°c 以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至 10(TC时,停止鼓风,应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后,不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏,应等候温度自然下降至 100°c以下方可开门。
4)水纯化装置:细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装贾或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除**物,因此用水时尚需冉次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。
5)冰箱:细胞培养室必须配备。
普通冰箱或冷藏杞
储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本
低温冰箱(-20 °c)、温冰箱
用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂,如酶、血清等。
细胞培养室的冰箱应属,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保持清洁。
6)细胞冷冻储存器:储存器常用的是液氮界器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小,取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。液氮界器的大小可自25L~500L,可以储存1m1的安甑250~15000个左右液氮温度可低达-196℃,使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发,应注意观察存留液氮情况,及时定期补充液氮,避免挥发过多而致细胞受损。
7)离心机:进行细胞培养时,常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用离心机。
一般可常规配置 4000rpni 的国产台式离心机,例如细胞沉降,使用 80~100g的离心机即可,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。
另外,可根据需要添置其他类型如大容显或可调节温度的离心机等。
若需用途,例如某些细胞的分离制备需梯度离心,则需另行配置实验所需的具备其他功能的离心机。
8)天平:常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。
分析大下的感;W:为 0.1mg、0.01mg和10.001mg。根据称取物质的;W:和称精度的要求,选择适宜级别的天平。要求精密称定时,当取样量大于 100mg 选用感量为 0. 1mg 天平,在 100— 10mg选用感量为 0.01mg 天平,小于10mg选用感量为 0.001mg 天平。
9)消毒器:直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。
10)滤器:目前细胞培养工作中采用的培养用液,包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在商温或射线照射下易发生变性或失去功能,因而上述液体多朵用滤过沙毒以除去细胞。
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动物实验室设施区域的设置
动物实验室分为区域:前区、饲养和试验控制区、后勤区。
前区的设置有隔离检疫室(应具备与动物级别相应的净化级别)、值班办公室、饲料室、一般走廊等。
控制区的设置有繁殖室、饲养室、实验室、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊、缓冲间等。
后勤区的设置有洗刷消毒间、环境控制设施、废弃物存放及处理等。
动物实验室区域的布置
当动物实验室只涉及一种动物试验时,其区域布置仅须考虑、物流能满足洁、污分流并符合上述区域设置的要求即可。但是,应注意布置中将饲养、试验、观察各室分开设置,如热源实验室不得与饲养和观察室设在一起,其他实验室不得与饲养室设在一起,若承担有繁殖任务的动物实验室,其繁殖室应立设置。另外,在人、物的走向上尽量避免折返,采用单向流,由清洁端进入控制区,从污物端退出控制区。
如果动物实验室内有多种动物试验,除了满足单一动物试验所需要的条件外,还应考虑以下内容,不同级别的饲养室和实验室分开设置,不同品种、同一品种不同品系、不同品种不同等级的实验动物不得混于同一实验(观察)室内。同级别的饲养室和实验室尽量集中,有条件的动物实验室可以将不同级别的后勤区分开设置,也可以集中设置后勤区,分别配备相应的清洗、消毒和器具灭菌设施。
在区域布置中不仅考虑上述内容,还应综合考虑净化空调机房的布置和送回风方式,净化空调机房应尽量靠近洁净控制区。在净化区的布置中还需留出适当的面积来满足送回风的要求,动物使用的笼架应避开送风口,防止空调风直接吹到动物笼架上,回风口一般在房间的下方,动物笼架与回风口应保持一定的距离。
净化区内各个房间面积设置是根据规模确定的。一种动物的饲养间面积以放置4-6个动物笼架为宜,房间面积约15-21m²,当**过6个笼架时,可设两个饲养间,既方便日常工作管理也方便意外情况的及时处理。
隔离检疫室的面积应能满足外购动物批量的观察。
动物实验室防护区
防护区主要指实验室建筑的区域。鉴于实验动物饲养的性,可能需要设设备、人员进出的控制、卫生防护带等。如果设施内从事涉及高致病原微生物的动物实验活动,须考虑设施的安保要求,以及一旦发生意外事故后对周围控制区域、疏散和救援的需求。的防护主要通过设置栅栏、围墙等方式实现。鉴于景观的需求,使用栅栏较显人性化。栅栏不应**2米,栏杆的间距不大于10厘米,栏杆要坚固、易于清洁。
此外,需要设置照明系统、报警系统和视频系统,较别的防护包括地下的电磁场报警、红外线报警和运动物体报警、低压电击等措施。防护区内一般不布置绿化,以免影响,同时也可减少昆虫、老鼠等。为保证正常的外来服务,如邮件、送货、访客等,通过风险评估决定是否需要建设安检、通道、中转站等措施。对控制区域应设置警示牌,避免无意闯入。对防护要求高的设施,应保证外来车辆不能靠近设施,距离保持至少30米。在防护区,宜设的外部人员和车辆。
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