免疫化学检测法是利用免疫学抗原抗体反应的灵敏性,以荧光素、酶、核素或电子致密物质等对抗原或抗体加以标记,对某些蛋白质(抗原或抗体) 进行检测的新技术。
免疫化学测定优点主要有:
1.灵敏度高,能测定样品中少量或酶。
2.特高,不受体液中其他物质的影响。
3.能测定一些不表现酶活性的酶蛋白,如各种酶原或去辅基酶蛋白,或因遗传变异而合成的无活性酶蛋白。
4.特别适用于测定同工酶。
免疫学沉淀反应:
可溶性抗原(外、血清、培养的滤液、组织浸出液等)与相应抗体特结合,在电解质参与下,形成沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。
1)单向扩散试验。这是一种抗原定量试验,是可溶性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反应。此法常用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量。
2)双向扩散试验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介质中相互扩散的沉淀反应。本法常用于定性试验,如检测血清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等。单克隆抗体技术
3)对流免疫电泳。对流电泳是一敏感快速的检测方法,即在电场作用下的双向免疫扩散。此法常用于检测血清中的乙型肝炎表面抗原与甲胎蛋白等。
免疫酶联免疫吸附试验:
本法的原理是利用酶(常用辣根过氧化物酶)标记的抗原或抗体,以测定被检标本中有无相应的抗原或抗体。有间接法、双抗体法、竞争法三种。
免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。
1. 体液免疫测定主要利用抗原与相应抗体在体外发生特结合,并在一些因子参与下出现反应,从而用已知抗原或抗体来测知未知抗体或抗原。此外,尚包括检测体液中的各种可溶性免疫分子,如补体、免疫球蛋白、循环复合物、溶菌酶等。
2. 细胞免疫测定法是根据各种免疫细胞(T细胞、B细胞、K细胞、NK细胞及巨噬细胞等)表面所具有的特标志和产生的细胞因子等,测定各种免疫细胞及其亚群的数量和功能,以帮助了解机体的细胞免疫水平。
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