在无菌室的设计中,通过向室内输送定量的洁净空气,稀释置换室内已使用过的洁净空气,将脏空气排出室外,使室内的空气洁净度等级达到100000级、10000级或局部达到100级的空气洁净度要求,室内已使用过的脏空气由清洁的空气取代,在空气的稀释置换设计中,脏空气与清洁空气持续地混合稀释,逐渐减少房间中的微粒负荷。置换稀释设计对洁净区域的空气净化系统的设计有很高的要求,而且必须考虑无菌室的布局和操作方式,还要为关键区间提供合适的局部单向空气流动保护,需要注意与空气净化系统供应的空气一样,满布空气过滤器的单向流动罩产生的空气流动也可以置换稀释房间中空气传播的微粒,这种空气流动会增加有效的房间空气交换率,并有助于污染空气置换稀释。无菌室内空气置换稀释污染系统设计时应注意:洁净空气供应的体积应足以抵消空间中不断产生的微粒数,以此维持工艺操作的基本条件要求;室内空间供应的空气应比普通维持条件下空气较清洁;要求混合供应的清洁空气应满足去除房间内含有微粒的空气,以达到室内空气置换稀释的作用。
无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点:
1、无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空气。内间面积2×2.5=5m2,外间面积1×2=2m2,高以2.5m以下为宜,都应有天花板。
2、内间应当设拉门,以减少空气的波动,门应设在离工作台远的位置上;外间的门好也用拉门,要设在距内间远的位置上。
3、在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上,应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm,内外都挂对拉的窗扇。
4、无菌室容积小而严密,使用一段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上(即离工作台远的位置),好为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、前开启,以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。
无菌室的消菌
(1)薰蒸:这是无菌室的措施。无菌室使用了较长时间,污染比较严重时,应进行薰蒸。
(2)喷雾:在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场,并有作用。可用5%石炭酸喷雾。
(3)紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的效果。通常应开启紫外线灯照射30~60min。
无菌室净化工程特点要求:
1、无菌室应完全封闭,进出无菌室至少要经两道门,中间隔有缓冲间,无菌室与外间设置一个可开闭的窗口,用于传递器具。
2、无菌室必须保持整洁。工作人员进入无菌室应换鞋、衣。无菌室使用前须用紫外线30min,操作结束后清洁台面,再用紫外线30min。
3、无菌室仅用于培养基分装等无菌操作,不能进行有菌标本的操作。操作人员操作时应严格关门并戴好的口罩与帽子。
4、无菌室内应有空气过滤装置,并安装空调。
无菌室内设备和用具
(1)无菌室内的工作台,不论是什么材质、用途的,都要求表面光滑和台面水平。
(2)在内室和外室各安装一个紫外灯(多为30W)。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方,离地面2m,外室的紫外线灯可安装在外室。
(3)外室应有的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
(4)内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
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