无菌室建造条件
1、无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
2、严防一切器材和培养基污染,已污染者应停止使用。
3、无菌室应备有工作浓度的液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的灭溶液等等。
4、无菌室应定期用适宜的灭溶液清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求。
5、需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法。
6、无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照30分钟以上,并且同时打开**净台进行吹风。操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照20分钟。
7、供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染。检查前,用70%的酒精棉球外表面。
8、每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性。
9、吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管。
10、接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧,待冷却后,方可接种培养物。
11、带有菌液的吸管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来溶液的桶内,后取出冲洗。
12、如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3%的来倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽后洗涤。
13、凡带有活菌的物品,必须经后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道。
14、无菌室应每月检查菌落数。在**净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,无菌后,取平板3~5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于30~35℃培养箱培养48小时,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得**过1个菌落,10000级洁净室平均不得**过3个菌落。如**过限度,应对无菌室进行,直至重复检查合乎要求为止。
无菌室净化工程特点要求:
1、无菌室应完全封闭,进出无菌室至少要经两道门,中间隔有缓冲间,无菌室与外间设置一个可开闭的窗口,用于传递器具。
2、无菌室必须保持整洁。工作人员进入无菌室应换鞋、衣。无菌室使用前须用紫外线30min,操作结束后清洁台面,再用紫外线30min。
3、无菌室仅用于培养基分装等无菌操作,不能进行有菌标本的操作。操作人员操作时应严格关门并戴好的口罩与帽子。
4、无菌室内应有空气过滤装置,并安装空调。
无菌室的消菌
(1)薰蒸:这是无菌室的措施。无菌室使用了较长时间,污染比较严重时,应进行薰蒸。
(2)喷雾:在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场,并有作用。可用5%石炭酸喷雾。
(3)紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的效果。通常应开启紫外线灯照射30~60min。
无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点:
1、无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空气。内间面积2×2.5=5m2,外间面积1×2=2m2,高以2.5m以下为宜,都应有天花板。
2、内间应当设拉门,以减少空气的波动,门应设在离工作台远的位置上;外间的门好也用拉门,要设在距内间远的位置上。
3、在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上,应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm,内外都挂对拉的窗扇。
4、无菌室容积小而严密,使用一段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上(即离工作台远的位置),好为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、前开启,以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。
无菌室工作规程
(1)无菌室。每次使用前开启紫外线灯照射30min以上,或在使用前30min,对内外室用5%石炭酸喷雾。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室换上已的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液将手浸洗2分钟。
(3)将各种需用物品搬进内室清点、位,用5%石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间喷雾,返回外室,5~10min后再进内室工作。
(4)接种操作前,用70%酒精棉球擦手;进行无菌操作时,动作要轻缓,尽量减少空气波动和地面扬尘。
(5)工作中应注意。如遇棉塞着火,用手紧握或用湿布包裹熄灭,切勿用嘴吹,以免扩大燃烧;如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时,应用浸润5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸润5%石炭酸的抹布擦拭台面或地面,用酒精棉球擦手后再继续操作。
(6)工作结束,立即将台面收拾干净,将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后,对无菌室用5%石炭酸喷雾,或开紫外线灯照射30min。
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