低温生物德选育和培养
要看你选什么规模的发酵是小试还是中试还是生产?另外,你说的选育里应该是包括了培养基配制和扩大培养。所以,只能大概列一下。
选育:**低温冰箱、无菌室、培养箱、摇床、分光光度计、检测设备。
培养基配制:电子天平、pH计、灭菌锅、微波炉、电磁炉、冰箱。
扩大再培养:灭菌锅、摇床、抽滤瓶(或特质金属瓶)、空调机组、臭氧发生器。
发酵:配料罐、种子罐、发酵罐、补料罐(小试用流加泵)、有时会用到在线监测设备如乙醇检测仪、生物传感器、分光光度计等、空压机、。
分离提纯:制水设备、制冷设备、浓缩机、细胞破碎仪、离心机、陶瓷膜、真空干燥设备、**低温冷干机、造粒设备(不同产品用到不同的烘干设备)等,不同工艺所用设备也不同
低温生物的孢子分离法
( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体,洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟,然后连同培养基一起放入接种箱内,经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时,再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹,把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种,然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养,可得纯。
( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布,置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后,便落下孢子,降氨氮低温生物菌种公司,形成印痕(即孢子印)。然后,用接种环或玻璃棒蘸取孢子,接种在平面或斜面培养基上,低温生物菌种公司,进行恒温培养,可得纯。
( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘,降Z总氮低温生物菌种公司,直径25 厘米左右,盘内先垫衬4~6 层纱布,*放1 副9 厘米直径的培养皿,大盖口朝下,上放小的,口向上。然后,在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架,再将带孔的玻璃钟罩盖上,**上罩孔用棉塞塞好,用纱布包好整个孢子收集器,置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。
低温生物的筛选分离
筛选:工业发酵的有用,其筛选步骤包括分离、初筛和复筛,挑选具有某种能力的有用。
分离:首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品,用无菌水稀释后,垃圾渗滤液低温生物菌种公司,涂布于置有适宜细菌、霉菌生长的琼脂培养基平皿上,并将其倒置于恒温箱中,培养一定时间,平皿上长出的许多单个菌落(单一微生物的集落)经分别分离后即为各种纯种菌株,简称纯种,移种至试管斜面培养基上,置4℃冰箱备用。
筛选模型:根据不同的筛选目的,采用不同的筛选模型。如常规筛选的方法是将土壤中分离所得的纯种,在含有琼脂培养基的平皿上培养后,用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上,在适宜的温度下培养一定时间后取出,如在菌块的周围有透明的抑菌圈,则表明此具有产生抑制试验菌生长的物质的能力。所得经过摇瓶液体发酵,测定发酵液或菌丝体内的含量,选出生产能力高的。另一方面对所提取的进行结构分析、药理试验及临床试验等,确为有效者,即可作为生产。又如筛选脂肪酶生产的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上,恒温培养一定时间,如菌落周围出现透明圈的,则该菌具有分解脂肪的能力,进一步作摇瓶发酵测定酶活力,挑选产量高者作生产的出发菌株。
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