PCR产物回收-友名生物公司

人ELISA试剂盒的原理及优势：

　　1、ELISA是以immune学反应为基础，将抗原、antibody的特异性反应与酶对底物的有效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

　　2、由于抗原、antibody的反应在一种固相载体──聚苯乙1烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。

　　3、Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在immune学检验的各领域中。

　　4、ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血1清或血浆中的抗人类HEV病毒Mantibody ELISA检测。

　　5、ELISA的基础是抗原或antibody的固相化及抗原或antibody的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或antibody仍保持其immune学活性，酶标记的抗原或antibody既保留其immune学活性，又保留酶的活性。

回收产物的检测

1.紫外分光光度计法检测DNA在OD260处有明显吸收峰，当OD260=1时，相当于大约50 ng/μL双链DNA、40 ng/μL单链DNA。OD260/OD280≈1.6~1.9时，说明DNA纯度较高。若洗脱时不用洗脱缓冲液，而是用去离子水，会使比值偏低，因为离子的存在会影响吸光度。但不表示纯度低。

2.SYBR法检测取回收产物1 μL，与1 μL SYBR染料混匀，于荧光透1视仪下观察是否有黄绿色荧光。

3.琼脂糖凝胶电泳法检测取回收产物5 μL，与10×Loading Buffer混匀，PCR产物回收，DNA Marker加5 μL，电泳后凝胶成像观察。5 μL DNA Marker相当于每个条带50 ng DNA，观察目的条带亮度大致为Marker的两倍，则大致估算其浓度约为20 ng/μL。

转移RNA

转移RNA（tRNA）在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%，绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。

tRNA一级结构具有以下特点：

①是一类单链小分子RNA，长73~95nt（共有序列76nt），沉降系数4S。

②是含稀有碱基zui多的RNA，含7-15个稀有碱基（占全部碱基的15%~20%），位于非配对区。

③5′末端碱基往往是鸟piao呤。

④3"端是CCA序列，其中的腺苷酸常称为A76，其3’—OH是氨基酸结合位点。

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