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加酶标：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“ ”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，山西检测试剂盒，以空白对照孔调零后测各孔OD值，检测试剂盒有哪些，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

检测及酶结合物的稀释度合适(均为1:30)， 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。白介素6是一种，已被证实为B细胞分化因子.它是一种形成系统，它的生理特性，如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的生激等，也备受关注.并且已证实白介素-6与病理学存在稳定的相关关系.例如，报道多种疾病的生长因子为白介素-6， 瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体。


间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。


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