免疫学检测方法体液免疫,即以B细胞产生抗体来达到保护目的的免疫机制。负责体液免疫的细胞是B细胞。体液免疫的抗原多为相对分子质量在10,000以上的蛋白质和多糖大分子,病毒颗粒和表面都带有不同的抗原,所以都能引起体液免疫。
免疫学体液免疫检测法
1.凝集反应。
颗粒性抗原(或红细胞等)与相应抗体特结合,在电解质参与下形成肉眼可见的凝集物,称之为凝集反应。
1)直接凝集反应。颗粒性抗原与相应抗体直接结合所产生的凝集现象,前者多为细胞表面的结构成分,如或红细胞的表面结构抗原。⑴玻片法:多用于抗原的定性检测。⑵法:多用于抗体的定量检测。
2)间接凝集反应。将可溶性抗原吸附于载体颗粒(如乳胶颗粒、红细胞等)的表面,称之为致敏颗粒。当致敏颗粒与相应抗体结合,即可出现凝集现象。这个反应常用于测定性抗体、病毒性抗体、钩端螺旋体和梅毒螺旋体抗体及某些自身抗体(如抗核抗体、抗肾抗体、抗甲状腺抗体等)。
根据凝集反应的原理,还有间接凝集抑制试验、反向间接凝集试验、协同凝集试验等。
免疫学沉淀反应:
可溶性抗原(外、血清、培养的滤液、组织浸出液等)与相应抗体特结合,在电解质参与下,形成沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。
1)单向扩散试验。这是一种抗原定量试验,是可溶性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反应。此法常用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量。
2)双向扩散试验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介质中相互扩散的沉淀反应。本法常用于定性试验,如检测血清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等。单克隆抗体技术
3)对流免疫电泳。对流电泳是一敏感快速的检测方法,即在电场作用下的双向免疫扩散。此法常用于检测血清中的乙型肝炎表面抗原与甲胎蛋白等。
免疫学中和试验:
特抗体可抑制相应抗原物质的活性,抗体使相应抗原的毒性或性消失的反应为中和试验。例如抗中和外的毒性,病毒的中和抗体可使病毒失去感染性等。诊断风湿热的抗链球菌溶血“O”试验也为一种中和试验。乙型溶血性链球菌能产生一种溶解人、兔红细胞的溶血“O”,该的溶血毒性可被抗溶血“O”抗体所中和而不出现溶血。试验时将病人血清与溶血“O”混合,作用一段时间后加入人红细胞,红细胞不被溶解为阳性反应,表示病人血清中存在抗溶血“O”抗体。血清抗体效价达400单位以上时提示患者曾感染乙型溶血性链球菌,有助于风湿热的诊断。
免疫酶联免疫吸附试验:
本法的原理是利用酶(常用辣根过氧化物酶)标记的抗原或抗体,以测定被检标本中有无相应的抗原或抗体。有间接法、双抗体法、竞争法三种。
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