青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测 欢迎咨询 上海宝予德科学仪器供应

**微量分光光度计在核酸定量和分析中的应用：

分光光度测定法是一项定量和分析生物成分的成熟技术。其中，核酸是生物实验室**常检测的生物成分之一，青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测。确定这些样品的浓度和纯度对许多下游实验至关重要。

核酸主要吸收260nm下的紫外光，其浓度可以应用朗伯比尔定律通过它们的相关消光系数和样品光程计算出来，青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测。

首先，260nm的紫外光直接照射样品，并且穿过样品，而另一边的光电检测器则测定有多少光被吸收，青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测。通过对照参比(一般是样品稀释液)，可以定量样品中的核酸浓度。

荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。

分光光度计的结构：

各种型号的分光光度计基本结构都相同，由如下五种部分组成：

1)光源(钨灯、卤钨灯，氢弧灯，氘灯、氙灯或激光光源)；

2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅)；

3)样品吸收池；

4)检测系统(光电池、光电管、光电倍增管)；

5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。

光源-单色器-样品吸收池-检测系统-信号指示系统。

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青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测荧光分光光度计有两个单色器，而一般紫外可见分光光度计只有一个单色器。

朗伯一比尔（Lambert - Beer）定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。当一束单色光（指路由一种颜色的光）通过一均匀的溶液时，一部分被吸收，一部分透过。

朗伯比尔定律：A = abc

其意义为：当一束单色光通过一均匀溶液时，溶液对单色光的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。

A =abc 中，吸光系数a，表征吸光物质的 灵敏度。a值越大，灵敏度越高。如果浓度的单位为物质的量浓度（单位为：mol/L），则吸光系数a可以写成ε ，ε称为摩尔吸光系数。

由上式可知，当溶液层厚度b和吸光系数a固定时，吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定比较大吸收波长 ，然后以此波长 的光为光源（单色光），进行吸光度A的测定，这是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。

**微量分光光度计检测蛋白A280：

蛋白和核酸不一样，具有很强的多样性。Protein A280功能应用于检测那些含有Trp、Tyr残基或者含有Cys-Cys二硫键的纯蛋白，这些蛋白在280nm吸光度明显。Protein A280功能不需要构建标准曲线，而是检测吸光度后，直接计算蛋白浓度。

Protein A280显示紫外吸收光谱，检测280nm处的吸光度后计算浓度（mg/ml）。和核酸检测一样，Protein A280记录显示的是10mm光程下的数据。

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使用分光棱镜或者光栅产生光谱，并利用其中特定的某个或某段光谱线强度来进行分析的仪器叫做分光光度计。

A260:是核酸比较高吸收峰的吸收波长，比较好测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内；如果吸光度小于0.05，检查是否存 在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。（请注意，这个值跟仪器无关，核酸的吸光度必需大于0.1，其值才有效和可靠，因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常 会对光有一定吸收，其值<0.1）；

A280:是蛋白比较高吸收峰的吸收波长.

A230:是碳水化合物比较高吸收峰的吸收波长：

A260/A280:是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值**1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

A260/A230:纯DNA和 RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0标明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或**溶剂污染，需要纯化样品。

Micro Drop**微量每次测量完毕后，用蒸馏水清洁上下光纤端面。云南全光谱波长**微量分光光度计

荧光分光光度计是以氙灯做为光源，而紫外可见分光光度计是以氘灯作为紫外区光源。青海高灵敏度**微量分光光度计菌液检测

**微量分光光度计与传统分光光度计相比，前者具备的*特优点在于（一）：

(1)所需样品体积小，*需0.5—2μl；

(2)不需要比色皿，用移液枪直接将样品滴加到检测平台上，测量时样品自动形成液柱，检测完成后只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可，避免了因为比色皿清洗不净带来的交叉污染；

(3)一般具有多个光程(电机控制自动选择)【BIO-DL MicroDrop基座模式下光程1.0 mm、0.2 mm、0.1 mm 和 0.05 mm自动调整】，而传统分光光度计的光程为10 mm，**微量分光光度计样品*稀释，测量范围可达到常规分光光度计的50倍【BIO-DL MicroDrop基座模式下dsDNA检测范围：2~15000ng/μl】。

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